Uso pretendido

O teste combinado Dengue NS1 Ag-IgG/IgM é um imunoensaio cromatográfico rápido para a detecção qualitativa de anticorpos (IgG e IgM) e antígeno NS1 do vírus da dengue para o vírus da dengue em soro ou plasma para auxiliar no diagnóstico da infecção viral da dengue.

[RESUMO]

A dengue é uma doença infecciosa aguda transmitida por vetores, causada pelo vírus da dengue transmitido por mosquitos.A infecção pelo vírus da dengue pode levar a infecção recessiva, dengue, febre hemorrágica da dengue, febre hemorrágica da dengue.As manifestações clínicas típicas da dengue incluem início súbito, febre alta, dor de cabeça, fortes dores musculares, ósseas e articulares, erupção cutânea, tendência a sangramento, aumento dos linfonodos, diminuição da contagem de glóbulos brancos, trombocitopenia e assim por diante em alguns pacientes.Esta doença é basicamente popular em áreas tropicais e subtropicais, porque esta doença é transmitida pelo mosquito Aides, razão pela qual a popularidade tem certa sazonalidade, ocorre todos os anos comumente em maio a novembro, o pico é em julho a setembro.Na nova área epidêmica, a população é geralmente suscetível, mas a incidência é principalmente adulta, na área endêmica a incidência é principalmente crianças.

Princípio

O teste combinado Dengue NS1 Ag-IgG/IgM é um imunoensaio qualitativo baseado em tira de membrana para a detecção de anticorpos do vírus da dengue (IgG e IgM) e antígeno NS1 do vírus da dengue em soro ou plasma.

Para teste IgG/IgM: O dispositivo de teste consiste em: 1) uma almofada conjugada cor de vinho contendo antígenos de envelope recombinantes de dengue conjugados com ouro colóide (conjugados de dengue), 2) uma tira de membrana de nitrocelulose contendo duas linhas de teste (linhas T1 e T2) e uma linha de controle (linha C).A linha T1 é pré-revestida com anticorpo para detecção de IgM anti-dengue, a linha T2 é revestida com anticorpo para detecção de IgG anti-dengue.Quando um volume adequado de amostra de teste é dispensado no poço de amostra do cassete de teste, a amostra migra por ação capilar através do cassete.O antidengue IgG, se presente na amostra, ligar-se-á aos conjugados da dengue.O imunocomplexo é então capturado pelo reagente pré-revestido na banda T2, formando uma linha T2 de cor bordô, indicando um resultado de teste IgG positivo para dengue e sugerindo uma infecção recente ou repetida.O antidengue IgM, se presente na amostra, se ligará aos conjugados da dengue.O imunocomplexo é então capturado pelo reagente revestido na linha T1, formando uma linha T1 de cor bordô, indicando um resultado positivo no teste IgM para dengue e sugerindo uma infecção recente.A ausência de quaisquer linhas T (T1 e T2) sugere um resultado negativo.

Para teste NS1: Neste procedimento de teste, o anticorpo NS1 anti-Dengue é imobilizado na região da linha de teste do cassete.Depois que uma amostra de sangue total/soro/plasma é colocada no poço da amostra, ela reage com partículas revestidas com anticorpo anti-Dengue NS1 que foram aplicadas na almofada da amostra.Essa mistura migra cromatograficamente ao longo da tira teste e interage com o anticorpo NS1 anti-Dengue imobilizado.Se a amostra contiver o antígeno NS1 do vírus da dengue, uma linha colorida aparecerá na região da linha de teste indicando um resultado positivo.Se a amostra não contiver o antígeno NS1 do vírus da dengue, uma linha colorida não aparecerá nesta região, indicando um resultado negativo.

Para servir como controlo do procedimento, aparecerá sempre uma linha colorida na região da linha de controlo, indicando que foi adicionado o volume adequado de amostra e que ocorreu a absorção da membrana.

Armazenamento e estabilidade

Armazene conforme embalado na bolsa selada em temperatura ambiente ou refrigerado (4-30°C ou 40-86°F).O dispositivo de teste é estável até a data de validade impressa na embalagem selada.

O teste deve permanecer na embalagem lacrada até o uso.

Coleta e preparação de amostras

1. O teste combinado Dengue NS1 Ag-IgG/IgM pode ser realizado em soro ou plasma.

2. Coletar amostras de sangue total, soro ou plasma seguindo procedimentos laboratoriais clínicos regulares.

3. Os testes devem ser realizados imediatamente após a colheita da amostra.Não deixe as amostras em temperatura ambiente por períodos prolongados.Para armazenamento a longo prazo, as amostras devem ser mantidas abaixo de -20°C.

4. Deixe as amostras atingirem a temperatura ambiente antes do teste.As amostras congeladas devem ser completamente descongeladas e bem misturadas antes do teste.As amostras não devem ser congeladas e descongeladas repetidamente.

Procedimento de teste

Deixe o teste, a amostra, o tampão e/ou os controles atingirem a temperatura ambiente de 15-30°C (59-86°F) antes do teste.

1. Deixe a bolsa atingir a temperatura ambiente antes de abri-la.Remova o dispositivo de teste da embalagem selada e use-o o mais rápido possível.Coloque o dispositivo de teste em uma superfície limpa e nivelada.

2. Para teste IgG/IgM: Segure o conta-gotas verticalmente e transfira 1 gota de amostra (aproximadamente 10μl) para o(s) poço(s) de amostra do dispositivo de teste, em seguida, adicione 2 gotas de tampão (aproximadamente 70μl) e inicie o cronômetro.Veja a ilustração abaixo.

3. Para teste NS1: Segure o conta-gotas verticalmente e transfira 8 ~ 10 gotas de soro ou plasma (aproximadamente 100 μl) para o (s) poço (s) da amostra do dispositivo de teste e, em seguida, inicie o cronômetro.Veja a ilustração abaixo.

4. Aguarde até que a(s) linha(s) colorida(s) apareça(m).Leia os resultados em 15 minutos.Não interprete o resultado após 20 minutos.

Interpretação de resultados

Positivo:

Para teste IgG/IgM: A linha de controle e pelo menos uma linha de teste aparecem na membrana.O aparecimento da linha de teste T2 indica a presença de anticorpos IgG específicos para dengue.O aparecimento da linha de teste T1 indica a presença de anticorpos IgM específicos para dengue.E se aparecerem as linhas T1 e T2, isso indica a presença de anticorpos IgG e IgM específicos da dengue.Quanto menor for a concentração de anticorpos, mais fraca será a linha do resultado.

Para teste NS1: aparecem duas linhas.Uma linha deve sempre aparecer na região da linha de controle (C), e outra linha colorida aparente deve aparecer na região da linha de teste.

Negativo:

Uma linha colorida aparece na região de controle (C). Nenhuma linha colorida aparente aparece na região da linha de teste.

Inválido: a linha de controle não aparece.Volume de amostra insuficiente ou técnicas de procedimento incorretas são as razões mais prováveis ​​para a falha da linha de controle.Revise o procedimento e repita o teste com um novo dispositivo de teste.Se o problema persistir, interrompa imediatamente a utilização do kit de teste e contacte o seu distribuidor local.